1. bahan percobaan
(1) Kertas Bacillus stearothermophilus (satu set tabung reaksi yang dijual oleh Perusahaan 3M juga tersedia). Bacillus stearothermophilus.
ATCC7053 adalah bakteri indikator biologis yang biasa digunakan dalam metode ini, mengandung 5 sel CFU/tablet.
(2) Kartu indikator kimia sterilisasi uap tekanan 121 ° C (pita indikator sterilisasi umum juga tersedia).
(3) Media air bromocresol purpura diautoklaf pada suhu 116 ° C selama 20 menit dan kemudian digunakan (seperti tabung reaksi yang dijual oleh Perusahaan 3M, media ini tidak boleh digunakan).
(4) Termometer residu O-150 °C (kalibrasi diperlukan oleh biro metrologi).
2. Metode dan hasil
Kertas Bacillus stearothermophilus (selanjutnya disebut sebagai tablet bakteri) ditempatkan dalam tabung reaksi tertutup dengan forsep steril. Kartu indikator kimia dan termometer titik ditempatkan dalam tabung reaksi terbuka. Siapkan 5-10 bagian dari masing-masing dua tabung di atas. Tempatkan mereka di lubang uap autoklaf, lubang pembuangan bawah dan outlet air bawah atau di tengah atas, bawah, kiri dan kanan. Jika alat sterilisasi ada di lantai dua, Anda harus meletakkan 10 tempat.
Termometer yang tersisa dapat digunakan untuk uji verifikasi setelah distandarisasi. Sebelum pengujian, kolom merkuri termometer harus dihancurkan hingga di bawah 40 °C. Perbedaan suhu termometer setelah setiap pemantauan harus antara 1 °C, menunjukkan bahwa distribusi suhu di dalam alat sterilisasi seragam.
Plak yang disterilkan harus dikultur pada suhu 56-60 ° C selama 24-48 jam dalam kondisi aseptik steril di bawah media air purin bromocresol yang disterilkan untuk mengamati perubahan warna. Jika media berubah menjadi kuning, B. stearothermophilus dalam tablet tidak sepenuhnya dinonaktifkan, dan bakteri masih dapat tumbuh dalam media, dan glukosa didekomposisi untuk menghasilkan asam menjadi kuning. Jika warna medium tidak berubah, masih ungu, menunjukkan bahwa spora telah dinonaktifkan. Pada saat yang sama, kertas yang tidak steril ditempatkan pada media sebagai kontrol positif, dan media kosong tanpa kertas digunakan sebagai kontrol negatif.
Warna indikator pada kartu indikator kimia berubah dari kuning muda menjadi hitam selama autoklaf. Saat warna berubah secara mendalam, dan dibandingkan dengan warna kontrol, dapat dinilai apakah efek sterilisasi memenuhi persyaratan. Kartu indikator kimia harus disimpan di tempat yang kering. Ini akan berubah warna saat terkena kelembaban, yang akan mempengaruhi pengamatan efek sterilisasi.
Sterilisasi uap bertekanan tinggi harus memungkinkan uap masuk ke alat sterilisasi dengan lancar, kontak dengan barang yang disterilkan, dan mengeluarkan udara dingin asli untuk mencapai efek sterilisasi. Distribusi panas tanpa beban dan verifikasi penetrasi termal beban penuh harus dilakukan (tidak lebih dari 2/3 dari total volume pada beban penuh). Kedua verifikasi diulang tiga kali dengan total enam kali.
Lima poin dan enam tes menunjukkan bahwa suhu berada pada 121 ° C, kartu indikator kimia menjadi hitam; derajatnya konsisten dengan warna kontrol; media tidak berubah warna, menunjukkan bahwa efek sterilisasi uap tekanan tinggi memenuhi syarat.
Autoklaf adalah instrumen yang kuat, tetapi inspeksi yang kuat hanyalah pemeriksaan parameter fisik instrumen. Oleh karena itu, alat sterilisasi yang telah menjalani pemeriksaan ketat juga harus memverifikasi efek sterilisasi. Beberapa unit sering mengabaikan masalah penting ini. Dalam sterilisasi portabel domestik, penunjuk instrumen sering mencapai suhu yang diperlukan, tetapi suhu sebenarnya dari barang yang disterilkan tidak memenuhi persyaratan. Menyebabkan barang yang disterilkan tidak teliti, mempengaruhi hasil percobaan. Media tidak disterilkan secara menyeluruh, mempengaruhi penggunaan media dan menilai hasilnya. Oleh karena itu, verifikasi efek aseptik dari autoklaf adalah masalah yang harus ditanggapi dengan serius.
Saat menggunakan alat sterilisasi uap bertekanan tinggi, pertama-tama berhati-hatilah untuk menghilangkan udara dingin dari alat sterilisasi saat membuka uap. Lubang ventilasi harus ditutup sebelum semua udara dingin di dalam unit dikeluarkan.
Jika masih ada udara di dalam alat sterilisasi, pengukur tekanan telah mencapai nilai tekanan tertentu, tetapi suhu di dalam alat belum mencapai derajat yang sesuai. Semakin banyak udara yang tersisa, semakin besar perbedaan antara keduanya, suhu di dalam perangkat tidak mencukupi, dan sterilisasi tidak lengkap. (Banyak orang akan memiliki gelembung di kateter kecil ketika mereka disterilkan dalam media fermentasi. Mungkin juga mencoba mengeluarkan lebih banyak udara dingin dari alat sterilisasi. Ini memiliki efek ajaib).