Pertama, waktu sentrifugasi
Waktu sentrifugasi merupakan faktor yang sangat penting yang mempengaruhi efek sentrifugal. Waktu sentrifugasi yang dibutuhkan untuk metode sentrifugasi yang berbeda akan berbeda. Berikut ini adalah pengenalan rinci sentrifugasi diferensial dan sentrifugasi gradien kepadatan yang sama dan sentrifugasi gradien kepadatan. Untuk sentrifugasi diferensial, waktu sentrifugasi mengacu pada waktu ketika partikel tertentu benar-benar mengendap di dasar tabung sentrifugasi; untuk sentrifugasi gradien densitas iso, waktu sentrifugasi mengacu pada waktu kesetimbangan di mana partikel sepenuhnya mencapai titik densitas iso; Waktu sentrifugasi dari sentrifugasi gradien kepadatan mengacu pada waktu untuk membentuk zona yang terdefinisi dengan baik. Untuk dua metode sentrifugasi terakhir, waktu pembentukan zona atau waktu kesetimbangan yang diperlukan rumit dan dapat ditentukan setelah pengujian.
Kedua, kecepatan sentrifugal
Kecepatan rotasi centrifuge terutama ditentukan oleh kecepatan rotasi rotor dan jari-jari rotasi partikel. Ketika menggambarkan kondisi sentrifugal, sering dinyatakan oleh medan gaya sentrifugal relatif. Dalam pekerjaan sebenarnya, data medan gaya sentrifugal mengacu pada nilai rata-rata, yaitu, Mengacu pada medan gaya sentrifugal partikel pada titik dalam larutan sentrifugasi.
Ketiga, pH dan suhu media centrifuge
Nilai pH media sentrifugasi umumnya diatur dalam kisaran pH di mana enzim stabil. Larutan buffer dapat digunakan. Dalam pengujian, penimbangan dilakukan, dan lingkungan centrifuge itu sendiri terkorosi dengan menghindari lingkungan peracid atau over-base.
Saat bekerja dengan sentrifugal, selain memberikan perhatian khusus pada pilihan media sentrifugal, kita juga harus mengontrol suhu dan pH larutan media untuk mencegah aglutinasi, denaturasi, dan penonaktifan zat yang dipisahkan. Kami akan mengontrol suhu sentrifugasi hingga sekitar 4 ° C. Untuk beberapa enzim dengan stabilitas termal yang baik, sentrifugasi juga dapat dilakukan pada suhu kamar.